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层析结果分析
发布时间:2024/10/11 16:25:22 浏览次数:14

在某些方法运行中,可能会创建多个连续的色谱图,为了查看和评估所有色谱图部分的最终曲线,必须将曲线相加 (ADD…) ;有时,如果从曲线中减去 (Subtract…) 空白运行曲线或基线曲线,可能会使曲线的呈现有所改善;曲线也可以相除 (Divide…) ,例如通过相除确定曲线之间的比列,作为研究峰纯度或识别峰的一种手段。


导入待算术处理的曲线

要对色谱曲线进行相加、相减、相除等算术处理,先须将待处理的不同结果曲线,导入同一个打开的结果文件色谱图中,以便后续相应的处理。


色谱曲线相加 (ADD…)


通常,同一个结果文件中具有多个色谱图层时,例如方法中使用New chromatogram指令,就会在运行结果下创建不同的色谱图层,为了查看和评估所有色谱图层产生的最终曲线,需要进行曲线相加,如图3,结果文件:Manual run 003中,包含两个色谱图Chrom1Chrom2,(当Manual run开始运行时,默认产生Chrom 1,运行到46.5 ml蓝色箭头位时,插入New chromatogram指令,就产生Chrom2Chrom2中继续记录和显示46.5 ml后面的数据和曲线),那么,如果想看到Chrom1Chrom2两部分紫外曲线组合产生的最终曲线,就需要加合两个色谱图中的紫外曲线。



色谱曲线相减 (Subtract…)


如果曲线有一些假峰来源于洗脱液中的杂质,可以通过减去空白运行曲线的方式,消除假峰;

如果曲线具有漂移基线,通过曲线相减,减去空白运行的基线来改进峰积分参数。如下图6。


色谱曲线相除 (Divide…)


色谱图中不同波长紫外曲线的比值可用来进行峰纯度的判定,或用于峰鉴别,UNICORN中可以通过两条曲线相除来实现这一功能,例如通过UV 280 / UV 260可以判断蛋白和核酸纯度。物质在不同波长下的吸光度比值可用于峰纯度的判断,如果峰是纯的,在整个峰的范围内,两个波长监测的吸光度的比值应保持恒定;同样,吸光度比值可用于对峰物质的鉴定,不同的化合物,具有不同的特定的吸光度比值。



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